Adipose tissue derived mesenchymal stem cell transplantation in the treatment of ischemia/reperfusion induced acute kidney injury in rats. Application route and therapeutic window

Abstract Purpose: To evaluate renal repair in rats who had renal infarction induced by the obstruction of blood flow in the renal artery and were treated with transplantation of adipose tissue derived mesenchymal stem cell Methods: 16-week-old Wistar rats (n=72) were used, submitted to celiotomy and had of the renal artery and vein clipped for 24 hours. The animals were randomly assigned to 10 experimental homogeneous groups, corresponding to the treatments with phosphate-buffered saline (PBS) or adipose tissue derived mesenchymal stem cell (ADSC), duration of application (24 or 48 hours), and site of transplantation (lateral vein of the tail or intrarenal). After the treatments were performed, at 8 and 31 days, four animals in each group were subjected to left nephrectomy for histological studies. Results: Histologically, a higher amount of cell debris and tubules devoid of the epithelium and a higher degree of necrosis were observed in the groups treated with PBS, as opposed to a low degree of necrosis and higher tubular vascularization in the groups treated with ADSC, particularly in the group treated with intrarenal ADSC 48 hours after injury. Conclusion: The transplantation of ADSC positively contributed to the replacement of necrotic tissue by renal tubular cells, vascularization of the renal parenchyma, and restoration of the organ function.

Minimum alveolar concentration of isoflurane in dogs administered two morphine doses / Concentração alveolar mínima do isoflurano em cães tratados com duas doses de morfina

ABSTRACT: This study aimed to evaluate the effects of intramuscular 0.5mg kg-1 (MOR0.5) and 1.0mg kg-1 (MOR1.0) morphine premedication on the minimum alveolar concentration of isoflurane (ISOMAC) in dogs. Eighteen client-owned female dogs were scheduled for elective ovariohysterectomy. Dogs received intramuscular MOR0.5 or MOR1.0 as premedication and propofol IV for induction of anesthesia. Isoflurane was delivered for maintenance of anesthesia and dogs were maintained under normocapnia and normothermia. Determinations of the ISOMAC were conducted by use of the "up-and-down" method. Noxious stimulus (placement of Backhaus towel clamps, a midline skin incision and subcutaneous tissue dissection) was delivered approximately 50 minutes after premedication with MOR0.5 or MOR1.0. The calculated ISOMAC was 0.98±0.15% in MOR0.5 and 0.80±0.08% in MOR1.0. The ISOMAC was significantly lower in MOR1.0 compared with MOR0.5 (P=0.010). Results of this study suggested that intramuscular premedication with morphine 0.5 and 1.0mg kg-1 decreases the ISOMAC in a dose-related manner in dogs.

RESUMO: O presente estudo objetivou avaliar os efeitos da administração intramuscular de 0,5mg kg-1 (MOR0,5) ou 1,0mg kg-1 (MOR1,0) de morfina sobre a concentração alveolar mínima do isoflurano (CAMISO) em cães. Dezoito cadelas de proprietários foram agendadas para ovário-histerectomia eletiva. As cadelas receberam MOR0,5 ou MOR1,0, como medicação pré-anestésica, e propofol IV para indução da anestesia. A manutenção da anestesia foi realizada com isoflurano em condições de normocapnia a normotermia. A determinação da CAMISO foi conduzida de acordo com o método "up-and-down". O estímulo nociceptivo (colocação de pinças Backhaus, incisão da pele na linha média e dissecção de tecido subcutâneo) foi realizado aproximadamente 50 minutos após a administração de MOR0,5 ou MOR1,0. A CAMISO calculada foi 0,98±0,15% em MOR0,5 e 0,80±0,08% em MOR1,0. A CAMISO foi significativamente menor em MOR1,0 do que em MOR0,5 (P=0,010). Os resultados do estudo sugerem que a medicação pré-anestésica com morfina nas doses de 0,5 e 1,0mg kg-1, pela via intramuscular, resulta em redução dose-dependente na CAMISO em cães.

Mesenchymal stem cell infusion on skin wound healing of dexamethasone immunosuppressed wistar rats / Infusão de células tronco mesenquimais sobre a cicatrização de feridas cutâneas em ratos wistar imunossuprimidos com dexametasona

ABSTRACT: To evaluate the therapeutic contribution of MSC intravenous infusion to surgical wound healing in dexamethasone-immunosuppressed rats, thirty-five rats were randomly divided into 2 groups: in the Control Group (CG), five rats received normal saline as 0.2ml subcutaneous (SC) injections every 24 hours, for 30 consecutive days and, in the Dexamethasone Group (DG), 30 rats were given 0.2mL subcutaneous dexamethasone (0.1mg kg-1) every 24 hours, for 30 consecutive days. After 30 days, all rats underwent surgery to create an experimental skin wound. The 30 animals of the DG group were divided into two equal groups, which received different treatments: the dexamethasone group (DG) received a single application of 0.5ml normal saline, via the intravenous route (IV), 48 hours after wound creation; and the Mesenchymal Stem Cells Dexamethasone group (MSCDG) received MSC transplantation at a concentration of 9x106 cells in a single IV application, 48 hours after wound creation. The surgical wounds of CG rats closed on average 14.75 days after creation and DG rats had wounds closed within 22 days; whereas, the surgical wounds of MSCDG rats were closed in 14 days. MSC infusion in dexamethasone-immunosuppressed patients contributed positively to epithelial healing in less time.

RESUMO: O presente trabalho teve como objetivo avaliar a contribuição terapêutica da infusão de células tronco mesenquimais na cicatrização cutânea de ratos imunossuprimidos com dexametasona. Utilizaram-se 35 animais, distribuídos em dois grupos: Grupo Controle (GC), formado por cinco animais que receberam aplicações de 0,2ml de solução fisiológica a cada 24 horas por via subcutânea (SC) e Grupo Dexametasona (GD), formado por trinta animais que receberam aplicações a cada 24 horas de 0,2mL de dexametasona (0,1mg kg-1), por via SC, todos durante 30 dias consecutivos. Após os 30 dias, todos os animais foram submetidos a procedimento cirúrgico para a criação de ferida cutânea experimental. Os 30 animais do GD foram subdivididos em dois grupos equivalentes, diferenciados quanto ao tratamento: Grupo Dexametasona (GD), que receberam uma única aplicação de 0,5ml de solução fisiológica, por via IV, 48 horas após a criação da ferida; e Grupo Dexametasona Células Tronco Mesenquimais (GDCTM), que receberam o transplante de CTM, na concentração de 9x106 células, em aplicação única, por via IV, 48 horas após a criação da ferida cirúrgica. Os Animais do GC também receberam uma única aplicação de 0,5ml de solução fisiológica, por via IV, 48 horas após a criação da ferida cirúrgica. As feridas cirúrgicas dos animais do GC fecharam em média 14,75 dias após a indução da lesão, os animais do GD tiveram suas feridas cirúrgicas fechadas em até 22 dias, já as feridas cirúrgicas dos animais do GDCTM foram fechadas em 14 dias. A terapia celular realizada em pacientes imunodeprimidos contribuiu positivamente para a cicatrização epitelial em menor tempo.

Diferenciação de células-tronco mesenquimais derivadas do tecido adiposo em cardiomiócitos / Differentiation of adipose tissue-derived mesenchymal stem cells into cardiomyocytes

FUNDAMENTO: O potencial de renovação e proliferação dos cardiomiócitos, in vivo, é pequeno, e por isso, o músculo cardíaco apresenta limitada capacidade de repor células perdidas. Na tentativa de minimizar os danos oriundos de lesões hipóxico-isquêmicas e daquelas que acometem o sistema de condução do coração, a terapia celular com células-tronco mesenquimais (MSC) vem sendo utilizada, inclusive com cardiomiócitos diferenciados a partir de MSC. OBJETIVO: O presente trabalho comparou três protocolos distintos de indução de diferenciação objetivando a sugestão de um método viável para a diferenciação de maior número de células funcionais que expressem fenótipo cardiomiogênico. MÉTODOS: Culturas de MSC obtidas de tecido adiposo de ratos jovens da linhagem Lewis transgênicos para proteína verde fluorescente (GFP) foram submetidos a três diferentes meios de diferenciação cardiogênica: Planat-Bérnard, 5-azacitidina e meio Planat-Bérnard + 5-azacitidina e observadas quanto a expressão de marcadores celulares cardíacos. RESULTADOS: Nos três protolocos utilizados observou-se formação da proteína alfa-actinina sarcomérica no citoesqueleto das células submetidas à diferenciação, expressão de conexina 43 na membrana nuclear e citoplasmática e formação de gap junctions, necessárias para a propagação do impulso elétrico no miocárdio, contudo, em nenhum protocolo foi observada contração espontânea das células submetidas à diferenciação cardiogênica. CONCLUSÃO: A indução com 5-azacitidina proporcionou diferenciação celular cadiomiogênica efetiva e similar à encontrada com o meio Planat-Bénard e, por ser um protocolo mais simples, rápido e com menor custo torna-se o método de eleição.

BACKGROUND: Cardiomyocytes have small potential for renovation and proliferation in vivo. Consequently, the heart muscle has limited capacity of self-renewal. Mesenchymal stem cells (MSC) therapy, as well as MSC differentiated into cardiomyocytes, has been used in the attempt to minimize the effects of ischemic-hypoxic lesions and those affecting the electrical conduction system of the heart. OBJECTIVE: The present study compared three distinct protocols for induced differentiation of MSC into cardiomyocytes aimed at finding a viable method for producing a large number of functional cells expressing cardiomyogenic phenotype. METHODS: Mesenchymal stem cells were obtained from the adipose tissue of young transgenic Lewis rats expressing green fluorescent protein (GFP), and submitted to three distinct differentiation-inducing media: 1) Planat-Bérnard, 2) 5-azacytidine, and 3) Planat-Bérnard + 5-azacytidine; further, these cells were identified based on the expression of cardiac cell markers. RESULTS: All three protocols detected the expression of sarcomeric-alpha-actinin protein in the exoskeleton of cells, expression of connexin-43 in the nuclear and cytoplasmic membrane, and formation of gap junctions, which are necessary for electrical impulse propagation in the myocardium. However, no spontaneous cell contraction was observed with any of the tested protocols. CONCLUSION: Induction with 5-azacytidine provided an effective cadiomyogenic cellular differentiation similar to that obtained with Planat-Bénard media. Therefore, 5-azacytidine was the method of choice for being the simplest, fastest and lowest-cost protocol for cell differentiation.

Lesões meniscas em pequenos animais / Lesiones d menissco en pequeños animales / Menscal injuriess in small animals

Os meniscos têm a função de diminuir a força de impacto e aumentar a estabilidade articular e a congruência articular da articulação do joelho. São estruturas semilunares, de constituição fibrocartilaginosa e em grande parte avascularizadas apresentando uma difícil cicatrização mediante uma injúria. Em cães, a lesão de menisco geralmente é secundária à ruptura de um ou mais ligamentos, principalmente, pela ruptura do ligamento cruzado cranial, e o menisco medial, o mais comumente lesionado, devido a sua pouca mobilidade. Independentemente da sua origem, mecanismo ou extensão, as lesões meniscais são tratadas com o objetivo de restaurar a integridade anatômica e funcional do menisco, visando à restauração da biomecânica articular. O presente artigo objetivou realizar uma revisão de literatura a respeito das lesões meniscais em cães e as opções terapêuticas disponíveis na prática da medicina veterinária.

The meniscus play a role in reducing the impact force and increasing joint stability and congruity of the knee joint. They are semilunar strucutes, with fibrocartilaginous constitution, and are largely avascularized. Therefore, they present difficulty in healing in face of an injury. In dogs, meniscus injury is usually secondary only to the rupture of one or more ligaments, mainly by the rupture of cranial cruciate ligament. The medial meniscus is the most commonly injured one due to its low mobility. Regardless of the origin, mechanism or extension, meniscus injuries are treated with the objective of restoring the anatomical and functional integrity of the meniscus, aiming the restoration of joint biomechanics. This paper aims to review the literature regarding meniscal injuries in dogs and the treatment options available in the practice of veterinary medicine.

Los meniscos tienen la función de disminuir la fuerza del impacto y aumentar la estabilidad articular y la congruencia articular de la articulación de la rodilla. Son estructuras similares de constitución fibrocartilaginosa y en gran parte avascularizado presentando difícil cicatrización mediante a una lesión. En perros, la lesión de menisco generalmente es secundaria a la ruptura de uno o más ligamentos, principalmente, por la ruptura del ligamento cruzado craneal, y el menisco medial lo más comúnmente lesionado, debido a su poca movilidad. Independientemente de su origen, mecanismo o extensión, las lesiones de menisco son tratadas con el objetivo de restaurar la integridad anatómica y funcional del menisco, pretendiendo la restauración de la biomecánica articular. Este artículo objetivó realizar una revisión de literatura a respecto de las lesiones de menisco en perros y las opciones terapéuticas disponibles en la práctica de la medicina veterinaria.

Association of mesenchymal stem cells with platelet rich plasma on the repair of critical calvarial defects in mice / Associação de células-tronco mesenquimais com plasma rico em plaquetas na reparação de defeitos críticos em calvária de camundongos

PURPOSE: To evaluate the effects of mesenchymal stem cells (MSC) from eight mice C57BL/6 gfp+ bone marrows expanded in cultures associated with platelets rich plasma (PRP) deriving from another eight mice, in the repair of critical defects in calvarial bone produced in twenty-four adult isogenic mice C57BL/6. METHODS: The animals were submitted to a cranial defect of 6.0mm in diameter and divided into two equal experimental groups. Control group did not receive treatment and the treated group received a MSC pellet containing 1.0 x 10(7) cells/mL associated with 50.0µL of plasma gel containing 1.0 x 10(9) autologous platelets within the defect. RESULTS: In the treated group was observed process of angiogenesis and bone repair better than control group. CONCLUSION: Mesenchymal stem cells derived from bone marrow of C57BL/6 gfp+ mice associated with PRP gel applied in bone critical defects produced in calvarial contributes positively to the process of bone repair.

OBJETIVO: Avaliar os efeitos da associação das células-tronco mesenquimais (MSC) oriundas da medula óssea de oito camundongos jovens C57BL/6 gfp+ e expandidas em culturas, com Plasma Rico em Plaquetas (PRP) provenientes de outros oito camundongos, na reparação de defeitos críticos confeccionados em calvária de 24 camundongos adultos C57BL/6. MÉTODOS: Os animais foram submetidos a um defeito craniano de 6,0mm de diâmetro e separados em dois grupos experimentais iguais. O grupo controle não recebeu tratamento e no grupo tratado foi administrado, no interior do defeito, pellet de MSC contendo 1,0 x 10(7) células/mL associado com 50,0µL de plasma em gel autólogo contendo 1,0 x 10(9) plaquetas. RESULTADOS: No grupo tratado verificou-se processo de angiogênese e reparação óssea superior ao grupo controle. CONCLUSÃO: A associação das células-tronco mesenquimais (MSC) derivadas da medula óssea de camundongos C57BL/6 gfp+ com gel de PRP aplicadas em defeitos ósseos críticos confeccionadas em calvária de camundongos C57BL/6 jovens, contribuiu positivamente para o processo de reparação óssea.

Contribuição do plasma rico em plaquetas na reparação óssea de defeitos críticos criados em crânios de camundongos / Platelet-rich plasma contribute to the process of bone repair of critical defects created in the calvaria of mice

No presente estudo, foram avaliados, de forma macro e microscópica, os resultados da aplicação do PRP em defeitos ósseos críticos de 6,0mm de diâmetro confeccionados em calvária de 24 camundongos isogênicos C57BL/6 jovens, separados em dois grupos experimentais. O grupo controle não recebeu tratamento, e no grupo tratado foram depositados, no interior do defeito, 50,0µL plasma em gel contendo 1,0x10(9) plaquetas. Constatou-se que o gel de PRP autólogo depositado em defeitos críticos contribuiu positivamente para o processo de reparação óssea, mormente na fase inicial.

This study aimed to evaluate macro and microscopic results after PRP application in bone critical defects of 6.0mm in diameter realized in cavarial of twenty-four young isogenic mice C57BL/6. Control group didn't receive treatment and in the treated group it was deposited 50.0µL of plasma gel containing 1.0x10(9) platelets in the defects. It was found that autologous PRP gel contributed positively to the bone repair process, especially in initial phase.

Propriedades mecânicas de meniscos frescos de coelhos e preservados em glicerina 98 por cento / Mechanical properties of the fresh rabbit menisci and of the menisci preserved in glycerin 98 percent

O presente estudo avaliou a resistência à compressão de meniscos mediais de coelhos da raça Nova Zelândia, por meio de teste mecânico de compressão. Trinta meniscos foram distribuídos em três grupos: grupo MF, composto por dez meniscos frescos; grupo MG, dez meniscos preservados em glicerina 98 por cento, por 30 dias, e grupo MR, dez meniscos preservados em glicerina 98 por cento, por 30 dias e reidratados em NaCl 0,9 por cento, por 12 horas. Os meniscos de cada grupo foram submetidos ao teste de compressão no sentido perpendicular ao seu plano anatômico regular e foram avaliados o limite de elasticidade, a deformação elástica, a tensão ao ponto de ruptura e ao limite de elasticidade e ainda, o índice de rigidez. Os meniscos dos grupos preservados, MG e MR, tiveram o limite elástico semelhante ao grupo de meniscos frescos (MF). O grupo de meniscos em glicerina (MG) apresentou menor capacidade de deformação elástica (P<0,05) que os grupos MF e MR, e maior capacidade de sofrer tensão ao limite elástico. Os meniscos do grupo (MG) apresentaram maior rigidez (P<0,05) que os meniscos dos grupos MF e MR. Conclui-se que o grupo de meniscos preservados em glicerina 98 por cento, seguido de reidratação em NaCl 0,9 por cento (MR), não apresentou alterações significativas na capacidade de resistência ao limite elástico dos meniscos.

The present study evaluated the compressive strength of medial menisci of New Zealand rabbits, through mechanical compression test. Thirty menisci were distributed in three groups: group MF, composed by ten fresh menisci; MG group, composed by ten menisci preserved in 98 percent glycerin for 30 days; and, group MR, ten menisci preserved in 98 percent glycerin for 30 days and rehydrated in NaCl 0.9 percent for 12 hours. The menisci in each group were submitted to compression test in the perpendicular direction to the anatomical plane and had the elasticity limit, the elastic deformity, the rupture stress point and the stiffness index evaluated. The menisci from the preserved groups MG and MR had the elastic limit similar to the fresh menisci group (MF). The group of menisci preserved in glycerin (MG) presented lower elastic deformity capacity (P<0.05) if compared to the other groups, MF and MR, and a higher tension capacity at elastic limit. The menisci from group (MG) presented higher stiffness (P<0.05) than the ones in the MF and MR groups. It can be concluded that the group menisci preserved in glycerin 98 percent followed by rehydration in Nacl 0,9 percent (MR), did not showed any significant alterations in the capacity of the menisci elastic limit.

Células-tronco mesenquimais / Mesenchymal stem cell

Dentre todas as células-tronco estudadas até o presente momento, as mesenquimais (MSC) destacam-se por sua elevada plasticidade, podendo originar tecidos mesodermais e não mesodermais. Além disso, possuem características imunomoduladoras e imunossupressoras que ampliam as possibilidades de utilização terapêutica. As MSC secretam uma grande variedade de citocinas pró e anti-inflamatórias e fatores de crescimento e, por meio dessas moléculas bioativas, proporcionam a modulação da resposta inflamatória, o restabelecimento do suprimento vascular e a reparação adequada do tecido, contribuindo para a homeostasia tissular e imunológica sob condições fisiológicas. Também podem induzir as demais células presentes no nicho tecidual a secretarem outros fatores solúveis que estimulam a diferenciação dessas células indiferenciadas, favorecendo o processo de reparação. A terapia celular com MSC é uma alternativa terapêutica promissora, porém a compreensão da biologia dessas células ainda é uma ciência em formação. Este artigo tem por objetivo realizar uma breve revisão sobre as células mesenquimais indiferenciadas.

Of all the stem cells studied so far, the mesenchymal stem cells (MSC) stand out for their high plasticity and capacity of generating mesodermal and non-mesodermal tissues. In addition, immunomodulatory and immunosuppressive features that expand possibilities for therapeutic use are present in these cells. A variety of pro and anti-inflammatory cytokines and growth factors are secrete for MSC and provide a modulation of inflammatory response, re-establishment of vascular supply and adequate repair of the tissue, contributing to tissue homeostasis under physiologic conditions. Therefore, they can induce secretion of soluble factors that stimulate their differentiation by other cells present at the niche's tissue, promoting the repair process. Cell therapy using MSC is a promises therapeutic alternative, but understanding the biology of these cells is still under construction. The aim of the article is to conduct a short review of these undifferentiated mesenchymal cells.

Plasma rico em plaquetas associado ou não ao osso esponjoso autógeno no reparo de falhas ósseas experimentais / Platelet rich plasma associated or not to autogenous bone graft on the reparation of experimental bone defects in the rabbits cranium

O presente estudo avaliou a influência do plasma autógeno rico em plaquetas (PRP), associado ou não ao autoenxerto esponjoso (EOE), na reparação de falhas ósseas criadas no crânio de coelhos. A falha I foi preenchida com o PRP; a falha II com 3mg de EOE; a falha III com EOE associado ao PRP e a falha IV não foi preenchida, servindo como controle. Após as cirurgias, os animais foram separados em três grupos e eutanasiados aos 30, 60 e 90 dias. Na avaliação mesoscópica, independentemente do período de observação, o preenchimento ósseo, na falha controle e naquelas tratadas com PRP, iniciou-se a partir das bordas para o centro e do fundo para a superfície das falhas. Já nas falhas tratadas com EOE e com enxerto associado ao PRP, foi notado também crescimento ósseo na porção central das falhas. Na análise radiográfica, foi observada maior radiopacidade no interior das falhas tratadas com EOE e com enxerto associado ao PRP, em todos os tempos. Microscopicamente, aos 30 dias, na falha tratada com EOE associado ao PRP, os fragmentos ósseos do enxerto estavam indistintos do tecido ósseo neoformado, presente em toda a borda do defeito, associado à moderada quantidade de tecido conjuntivo fibroso muito vascularizado e celularizado. Esse tecido apresentou material amorfo, eosinofílico e extracelular, junto a um processo inflamatório, constituído por linfócitos e, em menor número, por macrófagos e células gigantes multinucleadas, que podem ter influenciado negativamente a formação óssea precoce. Aos 60 e 90 dias, apenas focos ocasionais de inflamação linfocitária foram observados. O comportamento dos dois tratamentos, PRP associado ou não ao EOE, em relação a preenchimento ósseo, foi semelhante ao final do período de observação; o enxerto, utilizado de forma isolada, determinou precocidade de reparação óssea e a tromboplastina, utilizada para formação do gel de plaquetas, incitou uma reação semelhante a do tipo corpo estranho, que atuou negativamente...

The present study evaluated autogenous platelet rich plasma's (PRP) influence on the reparation process of four bone defects made on rabbit's skull, associated or not to autogenous bone graft (EOE). Defect I received PRP only; defect II received 3mg of EOE only; defect III received EOE associated to PRP; defect IV was left to heal naturally, serving as control. After each surgery the animals were randomly divided into three groups that were euthanized at 30, 60 and 90 days. In the mesoscopic evaluation bone ingrowth started from the defect's borders to the center and from the bottom to the surface for all observation times on the control (VI) and PRP only (I) groups. In the groups treated with EOE only (II) and EOE associated to PRP (III) new bone was observed in the center of the defects. Radiographic analysis showed greater central radiopacity for groups treated with EOE only (II) and EOE associated to PRP (III) at all observation times. Microscopically in the group treated with EOE associated to PRP (III) at 30 days the graft was indistinguishable from new bone present on the border of the defect, associated to a moderate quantity of a very vascularized and cellular fibrous connective tissue. This tissue showed an extracelular eosinophilic amorphous foamy material, associated to an inflammatory process constituted by lymphocytes and in less number by macrophages and multinucleated giant cells that may have negatively influenced early bone formation. At 60 and 90 days occasional spots of lymphocytic inflammation were observed. Both treatments, PRP associated or not to EOE, were similar for the bone ingrowth at the final time of observation; the graft used alone determined early bone reparation and thromboplastine used for the platelet gel formation incited a foreign body-like reaction that acted negatively on the initial reparation.

Hemogasometria em cães com desidratação experimental tratados com soluções eletrolíticas comerciais administradas por via intravenosa / Blood gas analysis in dogs with experimental dehidration treated with commercial electrolytes solutions by intravenous route

No presente estudo, foram comparados os efeitos da administração intravenosa de três soluções eletrolíticas comerciais sobre o equilíbrio ácido-base em cães desidratados experimentalmente por restrição hídrica e poliúria. Os animais foram aleatoriamente distribuídos em três grupos e tratados com três diferentes soluções eletrolíticas comerciais durante 12 horas: Ringer com lactato de sódio (RL), Ringer simples (RS) e Glicofisiológico (GF). Entre os tratamentos testados, a fluidoterapia intravenosa com solução de Ringer com lactato de sódio (RL) foi o tratamento que apresentou efeito alcalinizante, sinalizado por pequeno aumento nos valores do pH(a), cHCO3(aP), ctCO2(aP) e cBase(a), podendo ser utilizada no tratamento de animais com acidose metabólica de intensidade discreta a moderada. As soluções Ringer simples (RS) e glicofisiológica (GF) determinaram discreta diminuição na concentração de base titulável do sangue arterial (cBase), demonstrando efeito acidificante, o que as tornam uma opção para tratar cães com alcalose metabólica.

Three commercial intravenous electrolyte solutions were compared as for their effects on the blood acid-base status in dogs experimentally dehydrated by withholding water and inducing polyuria. Animals were randomly divided into three groups which were rehydrated with the following commercial electrolyte solutions during 12 hours: Lactate Ringerïs solution (RL), Ringerïs solution (RS) and a normal saline solution (0.9 percent sodium chloride) containing 5 percent dextrose (GF). The RLïs intravenous fluid therapy resulted in an alkalinizing effect demonstrated by a mild increase in arterial blood pH, ctCO2, bicarbonate (cHCO-3), and arterial blood base concentration (cBase) and, thus, can be used in animals exhibiting mild to moderate metabolic acidosis. In contrast, the RS and GF therapies led to a mild decrease in the concentration of arterial blood tritiable base (cBase) inducing an acidifying effect, which make them an option to treat dogs with metabolic alkalosis.

Plasma rico em plaquetas para reparação de falhas ósseas em cães / Platelet-rich plasma for canine bone restoration

As plaquetas chegam rapidamente ao local da ferida e liberam múltiplos fatores de crescimento (FC) e citocinas que contribuem para a reparação óssea e aumentam a vascularização local. O Plasma Rico em Plaquetas (PRP) concentra as plaquetas e os FC liberados por elas, aceleram a formação óssea e melhora a qualidade do trabeculado. Este trabalho apresenta um protocolo para confecção de PRP e demonstra alguns aspectos da sua utilização na reparação óssea de cães. O protocolo foi desenvolvido a partir de sangue coletado por punção jugular em três cães adultos, pesando em média 20kg. Para avaliação da aplicação clínica e dos aspectos da reparação óssea, foram criadas duas falhas mediais no terço proximal de cada tíbia. Assim, a falha 1 não foi preenchida, constituindo o controle, a falha 2 foi preenchida com 3mg de enxerto ósseo autógeno da crista da tíbia, a falha 3 com gel de plaquetas (PRP) e falha a número 4 com a associação PRP e 3mg de enxerto ósseo autógeno. O protocolo laboratorial proposto mostrou-se de fácil execução e de baixo custo e possibilitou a concentração adequada de plaquetas no PRP final, cujo número foi dependente da contagem inicial no sangue total de cada animal. A comparação da radiopacidade na região da falha, em todos os tratamentos, e ao longo do tempo demonstrou que o PRP associado ao enxerto determinou maior precocidade e uniformidade de radiopacidade, quando comparado à falha preenchida pelo PRP e ao enxerto usados isoladamente, e sendo que ambos determinam melhores resultados de preenchimento que a falha mantida sem tratamento.

The platelets arrive quickly at the injury site and release several growth factors (GF) and citokines that contribute to bone repair and increasing local vascularization. The Platelet-rich Plasma (PRP) concentrates the platelets and their growth factors, increasing the rate of bone formation and better quality of trabecular bone. This research presents a protocol to PRP formulation and demonstrates some aspects about the use in canine bone repair. In this protocol blood was obtained from the jugular ven of tree adult dogs with medium weight of 20kg to produce PRP. Two defects in the medial aspect of proximal third of the tibia were surgically created to evaluate the clinical and radiographic aspect of PRP. The control defect wasn’t treated.The defect 2 was filled with 3 mg of autogenous bone graft from the tibia crest. The defect 3 was filled with PRP alone and the number 4 with PRP in the combination with 3mg autogenous bone graft. The proposed laboratory protocol demonstrated to be easy to execute at low cost. Further, it was adequate to concentrate platelets in final PRP, whose number was dependent on the blood from each dog. Comparing the defect regions, was concluded that the association of PRP and bone graft showed greater precocity and uniform radiopacity than the PRP or bone graft isolated, although both determine better results than the defect without treatment.

Estudo microscópico da reparação de defeito osteocondral experimental da cabeça do úmero de cães após aplicação de laser a diodo de arsenieto de gálio (As-Ga) associado à administração oral de sulfato de condroitina / Articular cartilage defect repair in dog's umeral head after gallium arsenate(As-Ga) diode laser application and oral condroitin sulfate. Microscopic study

Introdução - Foram avaliados, microscopicamente, os efeitos do laser arsenieto de gálio (As-Ga) associado à administração oral do sulfato de condroitina na reparação da cartilagem da cabeça umeral de cães. Material e Métodos - Trinta e dois cães tiveram a articulação escápulo umeral esquerda abordada cirurgicamente. Uma área de seis milímetros de diâmetro foi delimitada e a cartilagem circunscrita foi removida até penetrar no osso subcondral. Os animais do grupo tratado (16 cães), além do procedimento cirúrgico, receberam sulfato de condroitina diariamente, iniciando-se no primeiro dia pós-operatório até atingir o período de observação determinado para cada subgrupo, associado à aplicação local de laser. Para microscopia, foi colhido um fragmento envolvendo a área do defeito. Resultados - A reparação aconteceu inicialmente a partir do coágulo de fibrina que preencheu o defeito, e de células mesenquimais indiferenciadas originadas na medula óssea. Este material transformou-se em tecido fibrocartilaginoso, com pequeno grupo de células com fenótipo condrocítico. A laserterapia local favoreceu a proliferação vascular, de forma mais evidente no osso trabecular subcondral, contribuindo para a nutrição e aporte celular na região do defeito. O aumento da vascularização local favoreceu a disponibilidade do sulfato de condroitina para o tecido de reparação, que induziu alterações no metabolismo celular, determinando aumento da atividade de síntese de proteoglicanos pelas células presentes no tecido remanescente. Conclusão - Houve aumento da vascularização na região do defeito osteocondral, potencializando a osteogênese e a reparação; houve aumento da atividade de síntese e manutenção da matriz cartilaginosa, e a reparação se deu por tecido fibrocartilaginoso.

Introduction - The study microscopically evaluated the effects of a gallium arsenate laser (As-Ga) associated with the oral administration of chondroitin sulfate in repairing the humeral head cartilage of dogs. Material and Methods - Thirty-two dogs had the left humeral joint articulation surgically approached. An area of six millimeters in diameter was cut and the cartilage was removed until the subchondral bone was penetrated. The animals in the treaty group (16 dogs), after the surgical procedure, received chondroitin sulfate daily beginning on the first postoperatory day and lasting throughout the determined observation period for each subgroup, associated with the local laser application. By microscope, fragments of the defective area were collected. Results - The repair initially happened to split the fibric coagula that filled the defect, and the mesenchymal cells originated in the bone marrow. This material transformed into fibrocartilaginous tissue, with a small group of cells with condrocyte phenotype. The laser therapy favored vascular proliferation, the most evident form in subchondral bone, contributing to nutrition and cellular support in the defective region. The rise in local vascularization favored the availability of chondroitin sulfate for repairing tissue. This persuades alterations in cellular metabolism, determining the rise in activity for proteoglicans cells present in the remaining tissue. Conclusion - There was a rise in the vascularization of the defective osteochondral region, bone creation, and repair. There was a rise in synthesis activity and the maintenance of the cartilaginous matrix, and the repair of the fibrocartilaginous tissue.

Autoenxerto de crista ilíaca de coelhos na união vertebral dorsolateral lombar / Iliac crest autograft in rabbit dorsolateral spinal fusion

Foi realizada artrodese dorsolateral das vértebras lombares L5-L6 de coelhos, avaliando-se a eficácia do autoenxerto da crista ilíaca na promoção de união vertebral. Foram utilizados 33 coelhos da raça Nova Zelândia Branco, distribuídos em dois grupos, com nove indivíduos no grupo 1 (G1), submetidos a descorticação bilateral dos processos transversos; e vinte e quatro indivíduos no grupo 2 (G2), que receberam 2g de autoenxerto da crista ilíaca sobre a área de descorticação. Três coelhos do G1 e oito do G2 foram submetidos à eutanásia as cinco, sete e nove semanas após o ato operatório e à avaliações por palpação, radiográfica e histológica no local do procedimento. Testes biomecânicos para avaliação de força e rigidez da união foram realizados somente nos animais do G2 e as vértebras adjacentes não operadas, serviram de controle. Os animais do G1 apresentaram mobilidade normal à palpação do segmento operado em todos os momentos de avaliação e não apresentaram evidência radiográfica de união. Na avaliação histológica foi observada discreta reação periosteal, sem evidências de formação de ponte óssea. No G2, as avaliações por palpação e radiográficas evidenciaram indícios de união óssea as cinco semanas, intensificando-se ao longo das semanas de avaliação. Na análise histológica foi observada reabsorção de fragmentos ósseos as cinco semanas, predominância de trabéculas ósseas e corações condróides, além de suprimento sanguíneo abundante as sete semanas e osteointegração em todo leito de enxertia as nove semanas, com predomínio de formação óssea endocondral. Os testes biomecânicos evidenciaram aumento da força e rigidez da massa óssea ao longo do tempo de avaliação. Quando foi realizada comparação das vértebras tratadas e não tratadas, os índices de união foram maiores em todos os momentos, no grupo tratado. Com os resultados foi possível concluir que alta percentagem de união vertebral foi conseguida quando o osso autógeno da crista ilíaca foi utilizado como material de enxertia em coelhos.

Polímero derivado de mamona acrescido de cálcio, associado ou não à medula óssea autógena na reparação de falhas ósseas / Castor oil plant polymer and calcium associated or not to autogenous bone marrow in bone gaps repair

Foram avaliados o processo de reparaçäo tecidual e o comportamento do implante de polímero vegetal extraído do óleo de mamona acrescido de 40 por cento de carbonato de sódio, associado ou näo à impregnaçäo com medula óssea autógena, em falhas ósseas experimentais em rádios de 30 coelhos e em sítio heterotópico em seis animais. Em quinze coelhos, a falha óssea no rádio direito foi preenchida por cilindros de polímero de mamona (grupo P) com dimensäo semelhante à da falha; a falha no rádio direito dos outros coelhos recebeu aspirado de medula óssea autógena junto com o implante (grupo M). A falha óssea no membro esquerdo de cada coelho näo recebeu nenhum tratamento e serviu como controle. Os seis coelhos restantes receberam seis implantes no músculo reto abdominal (sítio heterotópico), sendo que, em três animais, os implantes estavam embebidos em aspirado de medula óssea autógena. No local do implante, em ambos os grupos, foi observado aumento da radiopacidade, sem desvio de eixo ósseo ou reabsorçäo das extremidades ósseas receptoras. O grupo P apresentou áreas irregulares de calcificaçäo na regiäo periférica e sobre o polímero e o M apresentou um padräo de radiopacidade mais intenso, regular e precoce em relaçäo ao P. Na avaliaçäo histológica, em ambos os grupos, foi observada formaçäo de tecido ósseo imaturo com tendência à organizaçäo, brotos isolados de formaçäo de osso novo sobre o polímero em seus poros superficiais e nos poros internos que se comunicavam. Quando foi associado à medula, o implante permitiu a ocorrência de osteoconduçäo e osteogênese progressiva; houve migraçäo de capilares, tecidos perivasculares e células osteoprogenitoras entre os poros, com tecido fibrovascular invadindo a superfície do implante; a incorporaçäo dos implantes deu-se de maneira lenta e estava incompleta até as nove semanas do estudo; o implante foi biocompatível no período avaliado. Em sítio heterotópico, o implante foi incapaz de osteoinduçäo e histologicamente, em ambos os sítios de implantaçäo foram identificadas células gigantes e tecido fibroso envolvente